更新時(shí)間：2025-05-06
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技術(shù)簡(jiǎn)介
酵母雙雜交系統(tǒng)（Yeast two-hybrid system）是將待研究的兩種蛋白質(zhì)A和B的編碼DNA序列分別克隆（融合）到酵母表達(dá)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)錄激活因子（如GAL4等）的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（B-BD）和轉(zhuǎn)錄激活域（A-AD）上，構(gòu)建成融合表達(dá)載體，從表達(dá)產(chǎn)物分析兩種蛋白質(zhì)相互作用的系統(tǒng)。
如果A和B蛋白能夠相互作用，則DNA結(jié)合域和激活域緊密靠近，使轉(zhuǎn)錄激活因子起作用，啟動(dòng)報(bào)告基因（如b-半乳糖苷酶）的表達(dá)，通過(guò)檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物可以判斷相互作用的強(qiáng)弱。
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